Salle du Palais Holy Rood. Il dit que la ville a des émeutes. Quelqu'un qui ne lui était pas familier à la tête de la foule - des momies, des masques, des danseurs avec des cloches, des gens avec des cagoules noires - a menacé, prédit et exhorté les gens à ne pas obéir à la reine. Le courtisan de la reine Riccio confirme qu'il regarde aussi de temps en temps les gens écouter attentivement ces sermons. La page raconte en outre que les gens ont fait irruption dans la chapelle de la reine en criant: "Le nid des papistes!", Que le bouffon de Darnley, le mari de la reine, a sauté sur l'autel et a commencé à faire semblant d'être un sermon, et les gens lui ont répondu avec des distiques moqueurs. La reine Mary Stuart désespérée. Elle ressent la haine du peuple, la plupart des courtisans l'ont quittée; elle se demande comment son christianisme peut être si différent du christianisme du peuple écossais. Riccio propose de préparer immédiatement un décret punissant les responsables des émeutes. Maria dicte sa page, la page précise s'il faut entrer le nom de Heinrich Darnley, le mari de la reine. Mary hésite; elle soupçonne que les émeutes ont été inspirées par lui - après tout, la foule était dirigée par le bouffon du roi. Ici, Riccio lui rappelle qu'elle est la reine; elle est comme le soleil, et elle a le droit de punir de Dieu. Il demande d’appeler immédiatement l’officier de permanence pour annoncer le décret de la Reine. Douglas entre. Maria lui dit d'apporter le papier au chancelier royal Morton, afin qu'il tamponne. Douglas scanne le décret et constate qu'il n'a pas le nom du roi. Il interroge la reine à ce sujet. Riccio est responsable d'elle. Douglas s'emporte. Il exhorte la reine à ne pas utiliser de mesures de suppression sanglantes, laissant entendre qu'il considère cela comme une influence française ou italienne. Mais la reine lui rappelle froidement son pouvoir d'éliminer les sujets désobéissants à sa volonté. Une querelle éclate entre Riccio et Douglas, Douglas défie Riccio en duel et jure qu'il tuera le Vénitien demain. La reine part et emmène Riccio. Douglas est laissé seul, il envisage un duel. Morton entre. Douglas lui montre le décret. Morton est indécis: il a peur de la colère du roi et de la reine. Sans tamponner, Morton offre au roi. A cette époque, Henry était engagé dans une conversation avec son bouffon Nick, qui le taquine avec le fait que la reine a un vrai pouvoir en Ecosse, et Henry n'est que son mari, que la reine choisit des proches, par exemple, cet harpiste italien Riccio ... A cette époque, Morton apporte un décret malheureux. Roi de colère, il décide de tuer Riccio. Le roi Lindsay entre dans la cour, il appelle le roi à chasser avec le faucon nouvellement acquis. Morton répond que le roi a déjà une occupation aujourd'hui. Lindsay rejoint volontiers le complot contre Riccio. Il interdit littéralement de tuer Riccio ce soir, car il doit le tuer demain matin. Puis Henry, profitant du retard, envoie le bouffon à l'astrologue pour savoir quelle est la position des étoiles pour ses intentions.

L'astrologue de son laboratoire (il est aussi un alchimiste) argumente avec lui-même que l'expérience confirme la futilité de la science, cet objectif, la volonté des étoiles dominent l'homme, disposent du bien et du mal. Nick entre, arrose de mots, l'astrologue n'est pas inférieur à lui en esprit. Nick rapporte que le roi l'a envoyé pour s'enquérir du sort de Riccio et dit à l'astrologue de prédire la mort de Riccio. L'astrologue répond que les étoiles lui diront, pas les gens, et prédit à son tour la mort du bouffon. Avec ça, il part. La page de la reine provoquée par l'astrologue apparaît. Page aime sa maîtresse. L'astrologue lui dit de dire à la reine qu'aujourd'hui l'homme qu'elle aime va mourir. "Comment, Botwell va mourir aujourd'hui?" - s'exclame une page. L'astrologue est perplexe. Il avait en tête Riccio et se précipite sur la page pour l'avertir de cela. Resté seul, l'astrologue se demande - il est également apparu dans les étoiles que Botwell était en quelque sorte obscurément lié à la reine - à travers Mars, Saturne ... Botwell entre. De son monologue, il devient clair qu'il s'est retrouvé de façon inattendue dans la maison d'un astrologue. Réalisant où il est arrivé, Botwell demande à l'astrologue combien il lui reste à vivre. Le vieil homme répond que trois ans et que Botwell sera roi. Le botwell sort une bouteille de poison avec laquelle il voulait se suicider, veut la jeter - et hésite. En effet, dans l'atmosphère des intrigues de palais, n'importe quelle arme vous sera utile. Il s'en va.

La page annonce à la reine que Riccio viendra bientôt. La reine l'attend avec impatience - selon elle, lui seul lui est resté fidèle. "Et Botvel?" Demande la page. "Qui est Botvel?" - la reine est intéressée. Une page surprise raconte à Mary comment, en bateau, un vent fort a arraché une rose de la tête de la reine, une fleur est tombée dans l'eau. Et puis l'un des courtisans - Botvel - s'est précipité dans le bateau et a effrayé pourchassé le rameur pour attraper une rose de l'eau. Après avoir entendu l'histoire, Mary envoie une page pour prier. Elle avoue à Dieu qu'elle n'a plus de force pour résister à son amour pour Botwell. La reine sait qu'à la cour, elle est considérée comme amoureuse de Riccio. Riccio entre. Mary signale un danger mortel qui le menace et lui dit froidement au revoir, le dirigeant vers le navire qui le conduira à Rome. En désespoir de cause, Riccio tente de supplier la reine d'annuler la décision de partir. La reine est catégorique.

Heinrich, Morton et Lindsay ont appris le départ imminent de Riccio et ont conféré à la hâte de le tuer ou de le laisser naviguer. Ensuite, Douglas apparaît et rapporte que Riccio a déjà navigué. Douglas désespéré, il aspire à une vengeance sanglante, son honneur chevaleresque est blessé. Soudain, ils rencontrent une page qui apporte à la reine un mot de Riccio - il n'est pas parti et sera avec elle dans la soirée. Les conspirateurs emportent la note.

Maria est occupée à broder dans sa chambre. Riccio, qui est venu, lui explique qu'il ne pouvait pas partir, car il a un duel avec Douglas le matin. Il admet qu'il n'a pas besoin de la vie sans son amour. Il demande à Mary de lui donner une couronne de roses - il plantera des fleurs sur l'autel de Rome ... Henry, Douglas et Dindsay entrent et tuent Riccio. La reine s'évanouit. Douglas est frappé de honte et d'horreur - il se retire volontairement en exil. Henry est inquiet si la reine le déteste. Lindsay emmène le roi en lui chuchotant la prochaine chasse. La reine Botwell est invitée par la reine. Mary reprend ses esprits, voit Botvel et lui avoue son amour. Le botvel l'oblige à admettre qu'elle veut la mort d'Henry et lui donne sa bouteille de poison, disant que c'est un somnifère. Mary passe le «médicament» au roi, mais le poison boit le bouffon. Cependant, rien ne peut arrêter l'intrigue meurtrière - Botwell fait exploser la maison du roi Henry. Au loin, les cris grandissants de la foule se font entendre. Le botvel avec la reine se cache.